Promotie W.W. (Wouter) Woud

Samenvatting:

Extracellulaire vesikels (EVs) zijn miniscule (sub-micron) blaasjes die door alle cellen worden uitgescheiden en opgenomen, en daardoor rijkelijk aanwezig zijn in biovloeistoffen (bijv. bloedplasma en urine). Aangenomen wordt dat de biochemische samenstelling van EVs de status van hun ouderlijke cel weerspiegelt. Hoewel de huidige gouden standaard voor EV-analyse de isolatie van EVs inhoudt, suggereert nieuw bewijs dat EV-isolatietechnieken de eigenschappen van EVs kunnen veranderen. Om de status van een individu direct te kunnen volgen (zoals weerspiegeld in EV-concentratie, grootte, eiwitsamenstelling en inhoud), zijn nieuwe methoden voor EV-analyse - waarvoor geen EV-isolatie vereist is - nodig.

Deel I van dit proefschrift presenteert Imaging Flow Cytometry (IFCM) als een geschikte techniek die individuele EVs kan detecteren, verschillende EV-subpopulaties kan onderscheiden en EVs kan onderscheiden van niet-EV-deeltjes in complexe biovloeistoffen zonder voorafgaande EV-isolatie. Deel II van dit proefschrift demonstreert de karakterisering van EV-subpopulaties in complexe biovloeistoffen in de context van klinische niertransplantatie met behulp van de ontwikkelde op IFCM gebaseerde methodologie. Dit proefschrift laat zien dat marginale donornieren verschillende EV-subsets afgeven “op de pomp” (vóór transplantatie), en dat sommige van deze subsets gecorreleerd zijn met gevestigde parameters van nierkwaliteit. Ook beschrijft dit proefschrift de identificatie en monitoring van individuele, donorweefsel afkomstige EVs in plasmamonsters afgenomen van patienten vóór en na niertransplantatie, waarmee wordt aangetoond dat de ontwikkelde methodologie in staat is om klinisch relevante EV-subsets te identificeren.

Samengevat, het onderzoek zoals beschreven in dit proefschrift vertegenwoordigt een technologische vooruitgang voor het EV-veld door 1) de allereerste volledige kalibratie van IFCM voor sub-micron deeltjesdetectie aan te tonen, en 2) de detectie van individuele EVs in complexe, klinisch relevante biovloeistoffen.